(3) 弃上清，将农杆菌沉积悬浮于相应体积的浸透培育基里，使O.D600在0.8左右。
(4) 将农杆菌悬浮液直接喷洒至整个植株（或用抽真空的办法），盖上通明的塑料盖子或保鲜膜以坚持湿度，移入恒温室避光培育，第二天可开盖，正常光照培育。
9、用水将转基因种子置于含50mg/L Kan的MS平板上，4℃暗培育两天；20 mg/L Hyg潮霉素挑选接连暗培育7天；
10、Kan抗性挑选的种子在22℃，16h光照/8h黑夜光周期培育。两周后，经Kan抗性挑选的阳性植物体现杰出，长势正常，而阴性植物则不萌生或不久逝世。
留意：6-BA 母液旧日时用乙醇溶解。1/2xMurashige-Skoog是用MS的根本组分旧日，但很多元素折半。
(1) 制备好已转化了相应质粒的农杆菌菌液10ml，在转化前一天晚上，转入大瓶培育过夜，第二天取出使用时农杆菌液O.D600当在1.2到1.6之间。
将春化过的拟南芥种子种于浇过饱满PNS营养液的人工土中，并用保鲜膜罩上。两天后光照，三天后揭膜。
共转化农杆菌：于正午12点接菌于有YEP培育液的试管中10ul：10ml接种。28℃，3000rpm摇过夜，约30小时，次日下午6点将已摇活的菌按（1：400）及750ul菌液转至汉300毫升YEPK50Rif中培育28℃，300rpm约14小时，次日上午8点测OD值，用YEPRif作为空白对照，当菌液到达OD600为1.5~3.0之内时，可搜集菌体于250ml离心瓶（灭菌）,4℃，4000g 离心10min 。用10%蔗糖（含0.02%silwet）稀释至OD600 约为0.8-- 1.0左右即，用10%蔗糖作对照。转化时将花在溶液中浸泡50s左右，于弱光下成长。
人工培育室条件：相对湿度80%，恒温20-240C，光照强度80-200umol/M2/S，光照周期为8 h漆黑﹑16 h光照培育。
(4) 调查种子在固体挑选培育基上成长状况,可确定为转化子时,将转化子移栽至浇过饱满PNS营养液的人工土壤培育。
(1) 种子消毒：先用70%乙醇浸泡10分钟，在上述处理时要不时地使种子悬浮；然后用无菌水洗四次，在这步处理时最好也不时地使种子悬浮。
(2) 处理后的种子用Top agar（0.1%琼脂水溶液）均匀涂布在固体挑选培育基外表。一块150mm直径的平皿最多种1500棵。
5．标记好，将转化好的苗平放于盒子内，上盖封口膜封好，避光培育24hrs 2天后，将植株立起正常培育，洒水，3天1次。
取Columbia生态型的拟南芥种子，在EP管顶用70%的酒精消毒2-3min，10%次氯酸钠消毒10min，无菌水冲刷5-6次，用0.1%的Top agar混匀，平铺在1/2 MS培育基上，4℃保湿漆黑条件下春化3-4天，然后置于16h光照/8h漆黑光周期、2000-3000Lux、18℃、RH为70%条件下培育。一周后，挑选成长强健的麦苗移栽到培育土中。每周浇一次1/2 PNS培育液。当麦苗长至3-4cm时，去除花序，在去除顶端花序四天后进行转化。转化前将现已开花授粉的花和种子去除洁净。
5、将已授粉、结荚的拟南芥用消毒剪去除，倒置于装有浸透缓冲液的适宜巨细的容器上侵染50 S，用塑料薄膜掩盖整个托盘并适留通气孔后，在弱光下培育，24h后取下薄膜，于室温中持续培育。